原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當細胞數(shù)量達到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。當肝細胞被分離后,可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內細胞色素P450酶的活性和體內一致,隨時間的延長而迅速下降,故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復過來,保持了正常肝細胞的生物學特征及代謝活性,一般用于酶誘導研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產物推斷研究。貼壁原代肝細胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。上海貓原代肝細胞懸浮
原代肝細胞是指從肝臟中直接分離出來的細胞,這些細胞具有肝臟的特定功能,如合成膽汁、代謝藥物等。然而,原代肝細胞在體外培養(yǎng)時很難保持其原有的特性,而且無法傳代。這是因為原代肝細胞在體外培養(yǎng)時會失去其特定的細胞形態(tài)和功能,逐漸失活。為了解決原代肝細胞無法傳代的問題,科學家們研究出了一種新的細胞類型,即肝祖細胞。肝祖細胞是一種可以傳代的細胞,它們可以分化成多種肝細胞類型,如肝細胞、膽管細胞等。這些細胞可以在體外培養(yǎng)中保持其特定的細胞形態(tài)和功能,從而成為一種重要的研究工具。除了肝祖細胞,干細胞也被認為是一種可以傳代的細胞類型。干細胞具有自我更新和分化成多種細胞類型的能力,包括肝細胞。然而,干細胞在分化成肝細胞時,可能會失去一些肝臟的特定功能,因此在臨床應用中還需要進一步研究和改進。原代肝細胞來自于新鮮肝臟,可以保持原有的特性和性狀,但是體外培養(yǎng)難度系數(shù)較大;干細胞培育分化較為容易,但是分化時會有特性的丟失。相信隨著技術的不斷改進,體外培育高質量穩(wěn)定的肝細胞將不再是困擾技術人員的難題。深圳魚原代肝細胞貼壁立沃生物同批次的原代肝細胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復性,可以為客戶提供穩(wěn)定的實驗結果。
在新藥研發(fā)的過程中,原代肝細胞是不可或缺的重要實驗材料,這是因為肝臟能夠代謝大部分藥物。因此,通過使用原代肝細胞,可以更加準確地模擬藥物在人體內的代謝和毒理反應,為新藥研發(fā)提供更加可靠的數(shù)據(jù)支持。在藥物代謝實驗中,原代肝細胞可以幫助研究人員了解藥物在體內的代謝途徑、代謝產物以及代謝速率等信息。這些信息對于藥物的研發(fā)和臨床應用都具有重要意義。同時,在藥物毒理實驗中,原代肝細胞也能夠幫助研究人員評估藥物的毒性和安全性,為藥物的臨床應用提供保障。除此之外,原代肝細胞還可以用于藥物靶向誘導實驗。通過對原代肝細胞進行特定的處理,可以使其表達特定的蛋白質或基因,從而實現(xiàn)對藥物靶向的調控。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物的作用機制,為藥物的研發(fā)和應用提供更加可靠的指導。原代肝細胞在新藥研發(fā)中具有不可替代的重要作用。利用原代肝細胞,可以更加準確地模擬藥物在人體內的代謝和毒理反應,為藥物的研發(fā)和臨床應用提供更加可靠的數(shù)據(jù)支持。
原代肝細胞根據(jù)其形態(tài)和功能的不同可以分為多種類型。首先是肝細胞,也稱為肝細胞主細胞,它們占據(jù)了肝臟細胞總數(shù)的80%以上。肝細胞是肝臟重要的細胞類型,它們具有多種重要的生理功能,如合成和分泌膽汁、代謝和儲存營養(yǎng)物質等。其次是肝星狀細胞,也稱為伊氏細胞。肝星狀細胞是肝臟中的一種非常重要的細胞類型,它們具有多種功能,如調節(jié)肝臟免疫反應、維持肝臟微環(huán)境穩(wěn)定等。還有肝內膽管上皮細胞,它們是肝內膽管的主要細胞類型,具有分泌和排泄膽汁的功能。此外,還有肝內血管內皮細胞、肝內間質細胞等。總之,原代肝細胞的分類是非常多樣化的,每種類型的細胞都具有不同的形態(tài)和功能,它們共同構成了肝臟。對于研究肝臟疾病和開發(fā)新的therapeutic method來說,了解原代肝細胞的分類和功能是非常重要的。原代肝細胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的細胞。
原代肝細胞是藥物代謝研究領域非常重要的體外模型。原代肝細胞作為藥物代謝研究的經典模型,在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細胞共孵育,不但可對化合物在肝細胞中的代謝穩(wěn)定性進行研究,而且還可得到相對多量的高純度的代謝產物,在研究藥物生物轉化特征,尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當有證據(jù)顯示化合物的生物轉化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候,原代肝細胞更為不可替代的體外模型。原代肝細胞冷凍復蘇后若用于懸浮培養(yǎng),由于失巢凋亡一般壽命是6小時左右,而貼壁肝細胞可以存活達15天。北京魚原代肝細胞實驗
立沃生物原代肝細胞有著嚴格的體外培養(yǎng)規(guī)范和質量監(jiān)測機制,努力讓客戶收到的每一管細胞都是滿意的。上海貓原代肝細胞懸浮
如何提升原代肝細胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細胞的特殊性質,它們的活率和得率往往比一般細胞低,這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細胞的活率和得率,我們可以采取以下措施:1.優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件:原代肝細胞對培養(yǎng)條件非常敏感,因此我們需要針對不同的細胞類型和實驗目的,優(yōu)化培養(yǎng)條件,包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。2.選擇合適的細胞來源:原代肝細胞可以從不同的來源獲得,如人體肝臟組織、動物肝臟組織等,我們需要根據(jù)實驗需要選擇合適的細胞來源。3. 優(yōu)化細胞分離方法:原代肝細胞的分離方法也會影響細胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法,如機械分離、酶消化等,選擇適合的方法來分離細胞。4. 使用適當?shù)募毎囵B(yǎng)基:不同的細胞類型需要不同的培養(yǎng)基,我們需要根據(jù)實驗需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基。同時,我們還可以添加一些生長因子和細胞因子來促進細胞的生長和增殖。5. 保持細胞的穩(wěn)定性:定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。提高原代肝細胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素,包括細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。上海貓原代肝細胞懸浮